Серпуховский историко-художественный музей занимает видное место среди региональных музеев России во многом благодаря богатству художественной коллекции. В ней содержится целый ряд первоклассных, а в некоторых случаях даже уникальных работ, дающих достаточно полное представление о различных этапах развития отечественного искусства и основных западноевропейских художественных школ.
В современной экспозиции русского искусства представлены полотна Г. И. Семирадского, А. А. Харламова, К. Е. и В. Е. Маковских, Н. А. Ярошенко, И. К. Айвазовского, А. К. Саврасова, И. И. Шишкина, И. И. Левитана, В. Д. Поленова, В. В. Верещагина, В. М. Васнецова. В разделе западноевропейского искусства представлена живопись фламандской, голландской, итальянской, французской и других школ XVI–XIX вв.
Не менее значимы в культурном и историческом плане сберегаемые в музейных фондах и экспонируемые культовые реликвии, иконы, предметы мебели, скульптуры, графические работы, предметы декоративно-прикладного и гончарного искусства, образцы тканей, редкие книги и документы.
Художественная коллекция музея располагается в особняке XIX в., построенном по проекту известного архитектора Р. И. Клейна и принадлежавшем серпуховским купцам и фабрикантам Мараевым. Здание является объектом культурного наследия регионального значения.